En un estudio reciente publicado en Informes científicosEn este estudio, los investigadores describen la inmunogenicidad y la seguridad de las vacunas Nipah basadas en el virus de la viruela que se pueden usar en humanos y especies responsables de la transmisión del virus Nipah (NiV).
estancia: Inmunidad de las vacunas basadas en el virus de la viruela contra el virus Nipah. Crédito de la imagen: KaterynaKon/Shutterstock.com
fondo
NiV, una nueva enfermedad zoonótica en el sudeste asiático, se está propagando de los murciélagos frugívoros a los individuos, lo que provoca brotes catastróficos. Los murciélagos infectados pueden propagar el virus a humanos, caballos, cerdos, perros y gatos, entre otras especies. Las infecciones en humanos varían desde encefalitis asintomática hasta encefalitis fatal y enfermedades respiratorias graves.
El tratamiento de apoyo y el tratamiento con ribavirina redujeron la mortalidad en ausencia de una vacuna contra el NiV comercialmente disponible. El virus Nipah es un patógeno prioritario, lo que estimula el desarrollo de vacunas.
Los vectores virales recombinantes, las vacunas unitarias, el ácido ribonucleico mensajero (ARNm) y las plataformas de partículas similares a virus (VLP) son ejemplos de tecnologías de vacunas actuales que se preocupan principalmente por proteger el bienestar de los humanos y carecen de un único enfoque de vacunación basado en la salud.
sobre estudiar
En este estudio, los investigadores evaluaron la seguridad y la inmunogenicidad de la vacuna contra la viruela del mapache (RCN)-FG y la vacuna modificada Ankara (MVA)-FG que expresan la proteína de fusión (F) y la glicoproteína (G) del virus Nipah simultáneamente.
Se vacunaron ratones AJ y BALB/c con vacunas RCN-FG y MVA-FG, respectivamente, para caracterizar la expresión de organismos virales recombinantes. en el laboratorio y medir sus respuestas inmunes. Se administró una vacuna de refuerzo cuatro semanas después de la vacuna primaria.
Tres semanas después de la dosis de refuerzo, se obtuvo suero de rata y una semana más tarde se obtuvieron células de pulmón, bazo y lavado broncoalveolar (BAL).
Se realizaron ensayos de inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA) y ensayos de neutralización para evaluar las respuestas humorales, y se realizaron ensayos de citometría de flujo y ELISpot de interferón-gamma (IFN-γ), interleucina-2 (IL-2) y factor de necrosis tumoral-α (TNF-α) para evaluar las respuestas celulares.
Además, se realizó un análisis de inmunofluorescencia para determinar la localización celular y evaluar la expresión de proteínas de fusión y glicoproteínas en células infectadas con RCN-FG y MVA-FG, que se confirmaron mediante análisis de transferencia Western.
Los ratones se vacunaron por vía subcutánea (SC, una o dos dosis) e intranasal (dosis única) para evaluar la inmunogenicidad. Células de riñón de hámster infantil (BHK-21), células de fibroblastos embrionarios (CEF), Cercopithecus aethiops (Mono verde africano) Se usaron células epiteliales renales (Vero) y colecciones de cultivos americanos (ATCC) en los experimentos de cultivo celular.
El casete de expresión de MVA constaba de la proteína de fusión y la secuencia de glicoproteína de una cepa del virus Nipah aislada de Bangladesh en 2004 (NiVB), y el casete del gen RCN consta de la proteína de fusión y la secuencia de glicoproteína de una cepa del virus Nipah que se aisló durante el brote de 2018 en la India.
La proteína de fusión y la glicoproteína se coinmunoprecipitaron con inmunoglobulina G humana (IgG) y activador tisular del plasminógeno (tPA), respectivamente. El ácido desoxirribonucleico (ADN) amplificado por la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) de cada casete de expresión se utilizó para producir virus recombinantes.
resultados
Ninguna de las vacunas recombinantes causó signos clínicos significativos de infección o pérdida de peso con una alta producción de anticuerpos neutralizantes circulantes y respuestas IgA e IgG en el pulmón.
Vacuna MVA inducida por tejido y memoria efectora (T.METRO) grupo diferenciador 8ɑ+ (CD8ɑ+) linfocitos T en bazo y pulmones a granel, con memoria central (Tveneno) Expresión de linfocitos T CD8ɑ+ en los pulmones.
La vacuna RCN produjo linfocitos T CD8ɑ+ residentes (IN) y de memoria efectora (SC) en el bazo y linfocitos T CD8ɑ+ (IN) residentes en el tejido pulmonar. La proteína de fusión se detectó en células CEF infectadas con MVA-FG permeabilizadas y no perfundidas, mientras que la glicoproteína intracelular se detectó en células infectadas con MVA-FG.
La proteína de fusión y la glicoproteína se detectaron en las superficies celulares y las superficies intracelulares del virus de la viruela del mapache. El grupo IN indujo constantemente títulos de anticuerpos anti-F más altos en todos los puntos temporales (semanas 3,0, 5,0 y 7,0) que los otros grupos.
Los títulos de anti-G inducidos en animales de rata inmunizados con vacunas recombinantes fueron más altos que los títulos de anti-F. No se detectaron anticuerpos anti-F en tejidos respiratorios de animales vacunados con MVA-FG IN.
MVA-FG produjo la mayor cantidad de anticuerpos circulantes cuando se administró a SC; Sin embargo, IN produjo la mayor expresión morfológica de linfocitos T CD8+ efectores, residentes en tejidos y centrales tanto en células de pulmón como de bazo.
La vacuna contra la viruela del mapache desencadenó linfocitos T CD8+ efectores y residentes en tejidos en células pulmonares y células de bazo a través de las vías In y SC, lo que confirma que la inmunización oral es un método para estimular el sistema inmunitario con esta vacuna.
conclusiones
Según los resultados del estudio, las vacunas basadas en el virus de la viruela utilizadas para administrar la proteína de fusión y la glicoproteína NiV fueron eficaces y seguras.
Los resultados establecen a los vectores virales RCN-FG y MVA-FG como candidatos vacunales prometedores para proteger a humanos, mascotas y animales salvajes y mitigar el riesgo global de infección por el virus Nipah.
RCN-FG es una vacuna potencial para la vida silvestre contra el virus Nipah en cerdos y murciélagos para reducir la transmisión de níquel de los animales salvajes a los humanos y evitar las interrupciones económicas de las exportaciones de cerdos a áreas que carecen de reservorios de huéspedes competentes.
Al tener la capacidad de inmunizar tanto a los animales como a los humanos, la MVA-FG es una posible opción de vacuna sanitaria única y abre el camino para erradicar la enfermedad.
